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鸡细小病毒和鸡新城疫病毒双重PCR检测方法的建立

奉彬; 谢芝勋; 邓显文; 张艳芳; 谢丽基; 谢志勤; 范晴; 曾婷婷; 罗思思; 黄娇玲; 王盛; 刘加波 广西桂林市临桂区动物疫病预防控制中心; 广西临桂541199; 广西壮族自治区兽医研究所/广西兽医生物技术重点实验室; 广西南宁530001
  • 鸡细小病毒
  • 鸡新城疫病毒
  • 双重pcr
  • 特异性
  • 敏感性

摘要:旨在建立鸡细小病毒(ChPV)与鸡新城疫病毒(NDV)双重PCR检测方法,参考ChPV NS1基因和NDV F基因的保守区域,设计筛选、合成验证两对ChPV和NDV特异性引物,通过优化其反应体系,以及双重PCR的特异性、敏感性试验来评估建立的ChPV与NDV双重PCR检测方法。结果表明,建立的双重PCR同时扩增出687 bp ChPV和453 bp NDV片段,对ChPV与NDV的敏感性分别达到64 fg和25 fg,但对其他对照组病原体均无扩增,对ChPV与NDV混合感染的临床病料的检测结果与各病毒单项PCR检测结果相符。说明建立的ChPV与NDV双重PCR检测方法可用于临床上两种病毒混合感染的快速诊断。

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