摘要：【目的】朱砂叶螨是世界范围广泛分布的重要经济害螨,害螨防治十分困难.而几丁质酶是昆虫体内几丁质代谢中分解几丁质的关键酶,在更替新旧表皮和降解围食膜中起着重要的作用,几丁质酶是潜在的螨害生物防治靶标.本研究对朱砂叶螨几丁质酶TecCht1进行原核表达和纯化.【方法】克隆朱砂叶螨TecCht1基因的催化结构域,连接到pColdⅡ载体上,构建pColdⅡ/TecCht1重组表达载体,在大肠杆菌中进行高效表达,采用镍柱纯化目的蛋白,并进行Western Blot检测.【结果】TecCht1在pColdⅡ载体上成功高水平表达,确定最佳诱导表达时间为24h.对TecCht1进行大量表达和纯化,经Western Blot验证,获得纯度较高的目的蛋白.【结论】实现TecCht1体外高效原核表达,获得大量的TecCht1重组蛋白.